关于基因组RNA纯化试剂盒，你应该知道的事

浏览次数：714发布日期：2021-06-25

　　基因组RNA纯化试剂盒用于各种植物、动物和微生物的RNA提取。每个工具箱都有说明书。实验者只需遵循说明书中的步骤。它非常方便，适用于RNA的快速提取。提取的RNA完整性好，纯度高，可用于分子生物学后实验。

　　该试剂盒可用于从同一细胞或组织样品中同时纯化基因组DNA和总RNA。由于不需要将样品分成两部分进行不同的纯化步骤，该试剂盒可以在很大程度上回收DNA和RNA。纯化后的DNA和RNA分别洗脱，可立即用于各种下游实验。该试剂盒不含苯酚、氯仿等有毒物质，不需要乙醇沉淀。操作简单快捷。

　　基因组RNA纯化试剂盒的操作步骤是什么呢？

　　1. 样品处理

　　a、植物组织：在-70℃下取新鲜或冷冻组织100毫克℃然后在液氮中研磨，然后将粉末加入1ml裂解液中搅拌均匀。

　　b、动物组织：100毫克新鲜或冷冻-70℃加入1ml裂解液，用组织研磨杵或均质器均质。

　　c、贴壁细胞：直接将裂解液加入培养板中裂解细胞，每106个细胞加入1ml裂解液。用取样器吹匀。

　　d、细胞悬液：离心收集细胞。向106个动物、植物和酵母细胞或107个细菌细胞中加入1mL裂解液，混匀。

　　e、血液处理：取新鲜血液0.2-1ml，红细胞裂解液3倍体积，混匀，室温放置10分钟，10000rpm离心1分钟。弃去上清液，如果沉淀中含有红细胞，加入2倍体积的红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后，沉淀并添加1ml裂解液混合。

　　2、将处理后的样品在室温下放置5分钟，使核酸-蛋白质复合物*分离。

　　3、向匀浆样品中加入0.2ml三录甲烷，盖上试管，剧烈振动15秒，室温放置3-5分钟。

　　4、2-8℃离心℃12000rpm，持续10分钟。RNA主要在上层无色水相中，将水相转移到新管中，不吸收沉淀。

　　5、吸附柱预处理：向吸附柱中加入500ul洗柱液，室温放置2分钟，离心转速2-812000rpm℃放置2分钟，并丢弃废液。

　　6、向第4步收集的上清液中加入200ul无水乙醇，混匀，加入吸附柱中，静置2分钟，2-8转/分离心℃放置2分钟，并丢弃废液。

　　7、向吸附柱中加入600ul的漂洗液（使用前请检查是否加入无水乙醇），离心转速2-812000rpm℃放置2min，并丢弃废液。

　　8、向吸附柱中加入600ul冲洗液，以2-812000rpm离心℃放置2min，并丢弃废液。

　　9、以12000rpm离心2min，丢弃收集管，将吸附柱置于室温下几分钟，从吸附柱中除去残留的冲洗液。

　　10、将吸附柱放入新管中，将50-100ul无核糖核酸酶ddH2O滴入膜中芯，室温放置5min，12000rpm离心2min

　　即得到RNA。

　　好了，以上便是关于基因组RNA纯化试剂盒的相关内容介绍了。